自動定氮儀測定稻米中蛋白質(zhì)

 蛋白質(zhì)是生物體中含量高，功能重要的生物大分子，細(xì)胞和生物體在完成由基因編碼的生命活動過程中需要許多不同的蛋白質(zhì)協(xié)同作用，蛋白質(zhì)是細(xì)胞做功的工具，與生命的起源和進(jìn)化都密切相關(guān)。所以食品中蛋白質(zhì)的多少，不僅表示食品的質(zhì)量，也關(guān)系著人體健康。食品中蛋白質(zhì)含量高低是評價(jià)食物營養(yǎng)成份的主要指標(biāo)之一。稻米是人類重要的糧食作物，稻米蛋白質(zhì)因其較為合理的蛋白及氨基酸組成而表現(xiàn)出優(yōu)良的營養(yǎng)品質(zhì)，蛋白質(zhì)含量不僅影響其營養(yǎng)品質(zhì)，而且也對蒸煮品質(zhì)有重要影響。在評價(jià)稻米品質(zhì)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中蛋白質(zhì)及其含量被認(rèn)為是評價(jià)品質(zhì)并為深加工行業(yè)生產(chǎn)提供工藝參數(shù)的重要指標(biāo)之一。

  目前測定蛋白質(zhì)含量的方法有很多種，常見的有凱氏定氮法、紫外吸收法、雙縮脲法、考馬斯亮藍(lán)法和質(zhì)譜法等。有報(bào)道紫外吸收法無法測出牛奶、酸奶的蛋白含量，測出的豆?jié){蛋白含量也與實(shí)際值相差較大，不具實(shí)際使用價(jià)值。雙縮脲法是傳統(tǒng)的分光光度法測定蛋白質(zhì)的方法，準(zhǔn)確度好，精密度好，呈色穩(wěn)定性好，試劑單一，方法簡便，但靈敏度不高，約為1mg，故現(xiàn)在已很少使用。考馬斯亮藍(lán)染色法快速、靈敏，但只有作微量蛋白測定時(shí)的結(jié)果才準(zhǔn)確，因此在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)將樣品稀釋至蛋白濃度為0. 1-1mg/mL，而且實(shí)驗(yàn)必須在1h 內(nèi)完成， 不然測試結(jié)果不準(zhǔn)確。質(zhì)譜分析法中肽和蛋白的質(zhì)譜序列測定方法具有快速、用量少、易操作等優(yōu)點(diǎn)，但是質(zhì)譜的準(zhǔn)確性對測定結(jié)果有很大影響， 因此質(zhì)譜測序現(xiàn)在仍很難被應(yīng)用于未知蛋白的序列測定。測定蛋白質(zhì)常用的方法是凱氏定氮法， 它是測定試樣中總有機(jī)氮準(zhǔn)確和簡單的方法之一，被國內(nèi)作為法定的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法。凱氏定氮法適用樣品范圍廣泛、測試結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好， 但是傳統(tǒng)的凱氏定氮法多利用開氏瓶消化和半微量定氮蒸餾器定氮，裝置復(fù)雜，蒸餾過程較難控制，易發(fā)生倒吸現(xiàn)象而致實(shí)驗(yàn)失敗，并且消化時(shí)間長，對環(huán)境污染較大，不利于實(shí)際使用。本實(shí)驗(yàn)中使用定氮消化爐和自動定氮儀代替前兩者，既兼顧凱氏定氮法的準(zhǔn)確性，操作又非常方便，節(jié)省時(shí)間，提高了工作效率，可適合大批量樣品測定。

  本實(shí)驗(yàn)測定本地7 種稻米中的蛋白質(zhì)含量，并對測試結(jié)果作比較分析，為人們食用稻米提供參考。